Sterilizációa sejtbiológia és az orvosbiológiai kísérletek sarokköve. A legtöbb orvosbiológiai laboratórium nem tudna olyan munkát végezni, amely élő sejtek tenyésztésével járna sterilizált laboratóriumi műszerek nélkül. Míg sok laboratórium informális kapcsolatban áll a sterilitással, rendkívül ritka, hogy alábecsüljük a steril laboratóriumi műszerek hatását. Ennek ellenére a sterilizálást gyakran a belépő szintű laboratóriumi személyzet fontos feladatává teszik, hasonlóan az üvegedények tisztításához.
A gyenge műszersterilizálási folyamat nagyobb anyagi veszteséget eredményezhet, mint a sterilizáló létesítmények teljes hiánya. Ha a laboratóriumok rosszul sterilizált berendezéseket használnak, a kísérletek könnyen szennyeződhetnek, ami a használhatatlan vagy abnormális eredmények miatt veszteségeket okozhat. Egyes esetekben a szennyezett berendezések beszennyezhetik a többi műszert vagy hardvert, aminek következtében a laboratórium több kísérleti meghibásodást tapasztalhat, amelyeket nehéz elkülöníteni és orvosolni. A nem megfelelő sterilizálás ezen buktatóinak elkerülése szigorú és eredményorientált megközelítést igényel a sterilitás megfigyelésében – ez a gyakorlat, amelynek alkalmazása sok laboratórium számára előnyös lehet.
Milyen eszközöket kell sterilizálni?
A sterilizálás rendkívül fontos minden sejttenyésztési munkát végző laboratórium számára, olyannyira, hogy nem túlzás azt állítani, hogy minden sejttenyésztéssel foglalkozó laboratóriumi műszert sterilizálni kell. A legtöbb laboratórium sok hardverrel rendelkezik, és még ha sejttenyésztést is végeznek, nem vesznek részt közvetlenül a sejttenyésztési munkában. Fontos, hogy még a sejttenyésztéssel nem foglalkozó berendezések is profitálhatnak a sterilizálásból – feltételezve, hogy a laboratórium megengedheti magának a sterilizálás költségeit.
Például azok a laboratóriumok, amelyek rutinszerűen végeznek genetikai szekvenálást vagy PCR-t, nehéz gazdasági megoldásnak találhatják a molekuláris biológiai munka elvégzéséhez szükséges pipetták és termociklusok sterilizálását. Mivel ezek az eszközök nem vesznek részt a sejttenyésztésben, a nem teljesen sterilek következményei minimálisak – legalábbis ez az indoklás. Lényeges, hogy ez az indoklás helytelen.
Bár igaz, hogy ezeken a műszereken a biológiai szennyeződések nem okoznak nagyon drága sejttenyésztési kísérletek pusztulását a nem megfelelő mikroorganizmusokkal való érintkezés után, még az ex vivo kísérletek eredményeit is megronthatják a biológiai anyagok helytelen expozíciója.
A sterilizálás fontos óvintézkedés még olyan laboratóriumi hardverek esetében is, amelyek soha nem voltak közvetlenül kitéve semmilyen biológiai anyagnak. Például egy biológiai biztonsági szekrény belsejének fertőtlenítésével egy laboratórium biztosíthatja, hogy a kísérleteihez használt munkaterület ne váljon szennyeződés forrásává. Hasonlóképpen, az üvegedények sterilizálása biztosítja, hogy az érzékeny kísérletek mellett is használható legyen anélkül, hogy félne az eredmények tönkretételétől.
Azonban nem minden laboratóriumnak van pénze minden olyan sterilizálására, ami előnyös lehet. A sterilizálás gyakran költséges, ezért a legtöbb laboratórium végül a kritikus berendezések sterilizálását részesíti előnyben, miközben megengedi, hogy a sejttenyésztési területtől távol eső egyéb eszközök sterilizálatlanok maradjanak. Ezért a sterilizációs erőforrások katalogizálása jó szokás a laboratóriumi dolgozók fejlesztésében, mivel a sterilizálás nélkül nem használható hardverek kevés hasznot húznak, ha a laboratóriumban lévő többi berendezés többségét nem sterilizálják egymás után.
Mire van szüksége a laboroknak a műszersterilizálás során
A sterilizálási folyamat több különböző szakaszból áll, amelyek mindegyike eltérő mennyiségű helyet igényel a laboratóriumon belül. A sterilizálási folyamat térbeli összetettsége attól függ, hogy a laboratórium kutatást, klinikai munkát vagy gyártást végez. A gyártási és klinikai munka sterilitási követelményei magasabbak, mint a kutatási munkák, így a sterilizációs terek szegregációja és összetettsége nyilvánvalóbb. Röviden, a sterilizálási folyamathoz szükséges három hely:
fertőtlenítési terület
csomagolási terület
Sterilizálási terület
Minden helyiségnek más-más rendeltetése van, a sterilizálási folyamat azon szakaszának megfelelően, amelyik az elhelyezésért felelős. A dekontaminációs zóna az a hely, ahol a sterilitás alapja létesül, a lehető legtöbb szennyeződés eltávolítása olyan nyers módszerekkel, mint a nem steril vízzel történő tisztítás vagy tisztító vegyszerek.
Mivel a fertőtlenítés gyakran zűrzavaros dolog, a legtöbb laboratórium inkább a fő laboratóriumi munkaterületen kívüli dekontaminációs teret szeretne. A fertőtlenítés célja az összes látható szennyeződés eltávolítása a sterilizálandó műszerről vagy berendezésről. Ez magában foglalhat bármit a szennyeződésektől a csomósodó tisztítószerekig. Fontos, hogy a fertőtlenítési folyamat ne hagyjon hátra semmit, ami nem volt jelen a folyamat megkezdése előtt. Ezért a legtöbb dekontaminációs folyamat a berendezés vízzel történő tisztításával végződik.
A fertőtlenítést követően a laboratóriumnak úgy kell becsomagolnia a fertőtlenítendő berendezést, hogy a hardver funkcionális felületei ki lehessen téve a sterilizátor hatásának, de ne kerülhessenek ki a külső levegőbe vagy bármilyen más olyan környezetbe, amely új szennyeződéshez vezethet.
Ha például egy autoklávban lévő hordó belsejét forró gőzzel akarja sterilizálni, akkor a hordót úgy kell "csomagolni", hogy egy darab alufóliát lazán a hordó szájának tetejére helyez, és az oldalára ragasztja. Tehát autoklávozáskor Amikor a sterilizátorban lévő forró gőz sterilizálja a vödröt, a gőz a fólia alá áramolhat, sterilizálva a vödör funkcionális felületét (a folyadékot tartó belsőt), majd kifolyik. Mivel a fólia a hordóra van ragasztva, a hordó funkcionális felülete védve marad az elemektől és steril marad azután is, hogy a hordót eltávolítják az autoklávból. A klinikai anyagokat kezelő vagy gyógyszereket gyártó laboratóriumok esetében azonban a steril csomagolás szabványa messze túlmutat az egyszerű alufóliás vödör megoldáson.
A sterilizációs terület a sterilizálási folyamat szíve. A laboratórium megközelítésétől függően a sterilizálási területen többféle sterilizálási módszer egyikét használhatjuk. Ezek a módszerek magukban foglalhatják a forró gőzt és a nyomást, például egy szabványos laboratóriumi autoklávban, vagy egzotikusabb módszereket, például a gamma-besugárzást. A legtöbb laboratórium ragaszkodik a létesítményükben elérhető bármely sterilizációs módszerhez, ami azt jelenti, hogy az idő túlnyomó többségében autoklávot használnak. A gyógyszerek vagy orvosi eszközök gyártásával foglalkozó laboratóriumok esetében azonban gyakoribb a besugárzás.
Sterilizálási folyamat érvényesítése
A sterilizálás befejezése után a legtöbb laboratórium rendelkezik a számos módszer egyikével annak ellenőrzésére, hogy berendezése valóban teljesen sterilizált-e, és nem csak részben. Ezt a legegyszerűbben a szerény autoklávszalaggal ellenőrizheti. Bár csak autoklávban történő sterilizálás ellenőrzésére alkalmas, az autokláv szalag hatékony, mert a sterilizálási körülményeknek kitéve a teljes sterilizálási szín garantálásához szükséges ideig változik. Ezért sok laboratórium széles körben használ autokláv szalagot a sterilizálási folyamat során.
A bonyolultabb sterilizálási validációhoz sejttenyésztési kísérletek szükségesek. Egy tipikus sterilizálás-ellenőrzési kísérlet során egy életképes baktériumtenyészet mintáját átengedik a laboratóriumban alkalmazott sterilizációs eljáráson, majd a tenyészet edényét letörölgetik, hogy életképes sejteket kapjanak. A tamponokat ezután néhány napig tenyésztjük, és új sejtkolóniákat figyelünk meg. Ha nem nőnek telepek, a sterilizálási folyamat sikeres.
A sterilizáló csővezetékek készítése eredményeket ér el
Mielőtt a laboratóriumok sikeresen sterilizálhatnák a kapcsolódó sejttenyésztő hardvert, rendelkezniük kell a megfelelő kellékekkel. A sterilizálási folyamathoz szükséges nagy mennyiségű reagensek, tisztítószerek és eldobható eszközök nyomon követése nehéz lehet, különösen olyan laboratóriumok számára, amelyek nem rendelkeznek hosszú aszeptikus technika vagy steril gyártási gyakorlattal. Az autokláv szalagtól a dekontaminációs szakaszban lévő tisztító megoldásokig minden esetében a tapasztalt beszállítóval való együttműködés fontos tényező a sikeres sterilizálás és kísérletezés támogatásában.
